Испытайте O-PTIR с длиной волны менее 500 нм со встроенной флуоресцентной и одновременной рамановской спектроскопией с помощью mIRage-LS, первой в мире системы микроскопии.
- Флуоресцентная микроскопия и O-PTIR-спектроскопия с субмикронным разрешением расположены вместе
- Быстрая флуоресцентная идентификация и визуализация клеток, тканей, бактерий
О Мираж-LS
Платформа O-PTIR mIRage-LS с длиной волны менее 500 нм трансформирует исследования в области медико-биологических наук за счет объединения совмещенных O-PTIR и флуоресцентной микроскопии.
Флуоресцентная микроскопия обеспечивает молекулярную специфичность, а колебательная спектроскопия (ИК и комбинационное рассеяние света) позволяет получить пространственно детальную характеристику макромолекул. Сочетание этих методологий позволяет исследователям исследовать биологические образцы с беспрецедентной точностью.
Интеграция разрешения O-PTIR mIRage-LS менее 500 нм, а также одновременной рамановской спектроскопии и совмещенной флуоресценции позволяет получать корреляционные изображения в масштабах менее 500 нм.
Эта целостная, не требующая регистрации система сочетает в себе эти методы, обеспечивая путь к глубокому пониманию молекулярной проблематики и содействуя революционным открытиям, которые не могли быть достигнуты путем независимого применения любой из технологий.
Изображение предоставлено: Корпорация фототермической спектроскопии.
Совмещенная флуоресценция и субмикронное ИК-излучение клеток
Клетки нейроглиомы были помечены с использованием G3BP1 для идентификации белковых стрессовых гранул, DAPI для ядра и BODIPY для обнаружения липидов.
RBG накладывает широкопольное эпифлуоресцентное изображение: красным показаны гранулы белкового стресса, синим – ядро, а зеленым – липиды. Квадратные маркеры показывают места сбора спектров O-PTIR. Изображение предоставлено: Корпорация фототермической спектроскопии.
Изображение справа иллюстрирует светлопольный вид. Квадратные индикаторы обозначают области, где были собраны спектры O-PTIR.
Спектры O-PTIR были собраны в течение нескольких секунд из положений маркеров, отображаемых на левой и средней панелях. Могут быть идентифицированы отчетливые спектральные вариации, соответствующие целевым субклеточным характеристикам. Примечательно, что имеются небольшие изменения в полосе амида I стрессовой гранулы белка, что указывает на возможные различия во вторичной структуре белка по сравнению с другими местами.
Хотите узнать больше? Поговорите с экспертом
приложения mIRage-LS
Визуализация тканей и клеток
- Одиночные клетки: дифференцировка нормальных/патологических клеток, взаимодействие лекарственного средства с клетками, внутриклеточные (липидные капли) визуализирующие исследования.
- Ткани: тип клеток, кальцификация, болезненное состояние, ориентация коллагена.
- Бактерии: идентификация бактерий на уровне отдельных клеток, изучение клеточного метаболизма с помощью мечения стабильными изотопами (13С, 15Н, дейтерий)
Изображение предоставлено: Корпорация фототермической спектроскопии.
mIRage-LS использует совмещенную флуоресценцию для локализации измерений O-PTIR.
Срез ткани головного мозга мышиной модели болезни Альцгеймера был окрашен Amytracker 630, чтобы подчеркнуть амилоидные агрегаты, AF488 для иллюстрации белков и DAPI для маркировки ядра.
На рисунке ниже показано светлопольное изображение окрашенного образца. В правом верхнем углу находится составное флуоресцентное изображение RBG, на котором области агрегации амилоида выделены красным/оранжевым цветом. Примечательно, что некоторые амилоидные агрегаты, отмеченные на флуоресцентном изображении, нелегко идентифицировать на светлопольном изображении.
Ниже представлен усредненный спектр O-PTIR, полученный на основе профиля линии, изображенного на флуоресцентном изображении. Спектры усреднялись как в присутствии агрегата (синий), так и в его отсутствие (красный).
Средний спектр агрегата демонстрирует заметные изменения в пределах полосы амида I, подчеркивая заметную особенность при 1631 см-1, характерную для конфигураций бета-листа белка.
Это отчетливо иллюстрирует преимущества интеграции флуоресцентной визуализации для освещения областей агрегации амилоида, некоторые аспекты которых нелегко наблюдать с помощью светлопольной микроскопии, наряду с субмикрометровой O-PTIR-спектроскопией, которая способна предоставить данные о молекулярном составе.
В этом случае он особенно чувствителен к вторичной структуре белков, что является заметным преимуществом, связанным с ИК-спектроскопией.
Изображение предоставлено: Корпорация фототермической спектроскопии.
